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植物蛋白互作验证 BiFC/LCI
     双分子荧光互补 (Bimolecular Fluorescence Complementation, BiFC)是一项可直观、快速判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。将蛋白在某些特定的位点切开,形成不发荧光的N和C端2个多肽,称为N片段(N-fragment)和C片段(C-fragment)。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时,不能自发地组装成完整的荧光蛋白,在该荧光蛋白的激发光激发时不能产生荧光。但是,当这2个荧光蛋白的片段分别连接到1组有相互作用的目标蛋白上,如果目标蛋白质之间有相互作用,则在激发光的激发下,产生该荧光蛋白的荧光。反之,若蛋白质之间没有相互作用,则不能被激发产生荧光。
技术原理

萤火虫荧光素酶片段互补图像技术(LCI)是近年来形成的研究蛋白互作的新技术,把2个目标蛋白分别连接于萤火虫荧光素酶的C端和N端。如果2个蛋白互作,N段和C端接近形成有活性的荧光素酶。基于烟草瞬时表达的LCI技术将LCI技术与烟草瞬时表达相结合,在研究植物蛋白的相互作用中,可以实现活体细胞内实时、定量分析;不受植物自发荧光的干扰;而且操作简单,不需要裂解细胞提取蛋白质,可以很好的反映植物生理条件下蛋白的互作状态。
实例图片
服务要求
    1.基因序列或构建好的质粒。
    2.提供新鲜或保存完好的植物组织或RNA。
服务基本流程
    1.基因克隆,BiFC/LCI载体构建;
    2.转烟草;
    3.观察;
    4.实验报告。
交付数据及材料
    1.完整的实验报告,包括原始数据、详细的实验步骤及整理结果;
    2.构建好的质粒及农杆菌菌株。

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